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进行条件性恐惧实验要注意哪些事项
点击次数:25 发布时间:2022-07-20
  条件性恐惧实验系统(也叫场景恐惧系统)用于小型啮齿类动物(大、小鼠)环境相关条件性恐惧实验研究。啮齿类动物在恐惧时会表现出特有的不动状态(Freezing),动物在这种情况下倾向于保持静止不动的防御姿势。抗抑郁药和抗中枢兴奋药可以明显缩短不动状态持续的时间。实验过程中,实验对象被给与一个声音信号(条件刺激),随后给予电击(非条件)刺激。该训练称为条件性训练,训练结束后实验动物进行声音信号或环境联系性实验。一般情况下啮齿类动物对相应的环境和不同环境下同样的声音信号都会做出明显的条件性恐惧反应,如静止不动。这种测试可以在训练结束后立刻或几天后进行可以提供在条件信号影响下短期和长期记忆的信息。
  1.动物对电击的反应部分地取决于非条件刺激的电击强度和痛苦。当动物(尤其是基因改变的动物,如转基因或基因敲除小鼠)不能学会关联条件反射时,可能是电击强度不够或痛苦偏高所致。对条件反应程度与电击强度进行比较分析,可排除对电击强度因素的疑虑;对刺激电流强度(0.1^0.7mA)与反应作一“量-效曲线”,可评价动物的痛苦或对电击的敏感性。此外,格栅地板若沾有动物的排泄物也可改变电刺激强度。因此,应保持格栅地板的清洁与干燥。
  2.由于老年动物听力减弱甚至丧失,对听觉暗示可能反应迟钝或无反应。此外,有些品系的小鼠,即使在成年早期,对高频音刺激的反应尤其减弱。因此,用这一模型测定.老年动物或某些品系的小鼠时应特别谨慎,并避免用高频音刺激。
  3.要使动物在关联测试中表现凝滞行为,必须让其在操作箱内有适当的时间。应避免将动物放入箱内便立即给予电刺激,因为这样动物没有时间在电击与箱内环境(关联)之间形成联系。
  4.观察者必须快速、准确地判定动物是否表现凝滞行为,而不应在整个10s观察期间死盯着动物,以免动物在这10s间隙活动而导致计分不准。不同观察者应用同一种方法计分,两名观察者计分之间的相关系数应在0.98以上。同样地,当采用自动计分系统进行计分时,应对系统进行调节,使之与人工方法计分相比,两者的相关系数在0.98~~1之间。
  5.在本实验中,先测试关联学习,再测试暗示条件反应。在关联测试中没有听觉暗示刺激,因此,动物在暗示条件测试时对听觉刺激的反应有可能发生消退(extinction)。理论上,这种听觉暗示反应可能减弱。为消除这种实验偏差,将其中一半动物先测试听觉暗示反应,一小时后再检查关联条件反应。
  6.实验分两天进行。训练和测试应在每天的同一时间进行。测试(凝滞计分)所花的时间比训练要长的多,因此,同--批训练的动物不宜过多。
  7.暗示和关联两种条件恐惧可表现出发育差异和基因差异。例如,年龄在18天的大鼠有听觉条件恐惧,但极少有关联条件恐惧;而到23天时,关联和听觉暗示条件恐惧都有。有些品系的小鼠(如DBA/2小鼠)只有很弱的关联条件恐惧,但听觉条件恐惧却很好。
  8.对有些基因型动物,如果预先让其短暂适应关联条件,关联学习会得到改善。一般认为这与海马功能增强有关。这种适应通常在训练前一天进行,而且时间很短(30^60s)。
  9.暗示条件恐惧由侧杏仁核调节,而关联条件恐惧由杏仁核和海马共同介导。毁损这些脑区可削弱或阻断暗示与关联恐惧条件反射。
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