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转载:大鼠旷场实验指标检测及参考值的探讨
点击次数:505 发布时间:2020-11-25

【摘要】 目的 将小动物行为学分析系统用于大鼠旷场实验,并对测定指标与传统的评判标准进行相关性分析, 建立旷场实验中各指标的平均值及 95% 置信区 间。通过对旷场实验大鼠进行筛选,减少个体差异对结果造成的影响。方法 用小动物行为学分析系统测定分析 3 min 内旷场分析箱中大鼠运动距离和中央区域运动距离,同时记录大鼠穿 格数与中央区域停留时间。结果 穿格数与运动距离相关性良好( r = 0. 959,P < 0. 01) ,中央区域停留时间与中央区域运动距离相关性良好( r = 0. 915,P < 0. 01) ,建立了各测定指标参考值。结 论 可以用测定运动距离和中央区域运动距离代替传统的穿格数和中央区域穿格数。

【关键词】 小动物行为学分析系统;旷场实验;相关性分析;参考值

实验动物的整体自主行为学分析研究在毒理学、精神药理学、评估药物和环境对动物行为的改变及对神经系统的作用等领域中广泛应用。随着现代计算机技术与图像分析技术的发展,以此类技术为基础 的动物自动行为学数据采集分析成为发展的趋势, 但这些新技术下测定指标与原有的是否一致,新的指标与传统测定指标间的相关性如何鲜见报道。现进行 大鼠的旷场实验,对旷场实验传统指标与小动物行为记录分析系统指标进行相关性分析以确立之间的关系并建立其参考值范围。

材料与方法

1. 1 动物 Wistar 大鼠,雄性,SPF 级,体 质 量 180 ~ 220 g,南 方 医 科 大 学 实 验 动 物 中 心 提 供,合 格 证 号: SCXK(粤)20060015。

1. 2 仪器 小动物行为记录分析系统 ;旷场分析箱木板 100 × 100 × 40 cm(长× 宽 × 高),箱底均分为 25 个方格(20 × 20 cm),内部墙壁涂黑,沿墙格称为外周区域,其余为中央区域。

1. 3 测定条件 行为学实验室保持安静通风,室内暗光,手术灯照天花板反射到实验操作区;实验人员远离旷场分析箱(以操作角度看不到箱中实验动物为准)。实验前,动物在测定房间中适应 10 min 以上。

1. 4 测定方法 小动物行为学分析系统中将旷场分析箱从左上开始,按左到右顺序以不同颜色编号为相同的 25 个小格,其中 7、8、9、12、13、14、17、18 和 19 为中央区域,其余为外周格,13号格为正中格。每次实验时捏住大鼠尾巴距根部 2 /3 处轻放入 13 号格中,显示器中观察其 3 min 内 活 动 情 况,每次测定结束将动物排泄物清除干净,每只仅测定 1 次。实验时间结束 录像分析,软件统计。

 

1. 5

统计学方法 用 SPSS13. 0 统计软件对各项指标数据进行正态分布检验,符合正态分布者用 x珋± 1. 96 s 计算正常参考值范围,不 符合者,用百分位数法求P 2. 5 ~ P 97. 5 分布范围。相关分析的双变量符合正态分布者采 用 Pearson 相 关 分 析,不服从正态分布用Spearman相关分析。

2 结果

2. 1 测定指标的平均值

3 讨论

旷场实验是将一定面积划分为不同区域,并以相应的格子对应。大鼠在新环境中是由紧张、兴奋、探索 再到适应的一系列过程,兴奋性的老鼠在适应的环境中表现为行动活跃,四处走动,留下自身的生物气息,跨格次数的多少反应其兴奋程度。跨格次数的多少与动物的行动量成正比,跨格次数多,活动距离也应增加,但由于局限于当下实验条件,以往只能用跨格次数从侧面反映行动的长短。从 3 个批次实验结果可知,矿场实验中动物总运动距离和总穿格数、央区域运动距离与中央区域停留时间都具有良好相关性,重复性好,也证明了他们间的对应关系。现在以大鼠总运动距离等新指标应能更直接地反应动物的兴奋程度,从而避免了传统的人为观察、手工记录,所造成标准不一致性、主观性程度大、费时费力等缺点,也很好的解决了观察人的行为对实验动物的“二次应激”的不足,取得更加真实准确的实验数据。

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