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浅析条件性恐惧实验的建立、场景恐惧实验表达测试方法
点击次数:100 发布时间:2022-04-07

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小鼠条件性恐惧模型的建立

小鼠购入后适应性饲养6d,实验当天提前1h放入实验间。不同品系小鼠放入电击箱内(A环境) 自由探索 2min(适应期)后,给与30s声音刺激 (85dB,5000Hz),后2 s伴随给与不可逃避的足底 电击(0.6mA,持续2s),声音-电击共配对5次,每 次间隔2min。计算机软件记录各个阶段(包括适应期、5轮声音刺激期和5轮间歇期)的僵住时间,僵住 时间百分率(%)=僵住时间(s)/总时间(s)×100%。 僵住行为是啮齿类动物表达恐惧的方式,表现为除 呼吸运动外全身其余的肌肉运动均消失。

02

场景恐惧和声音线索恐惧表达的检测

场景恐惧表达检测:条件性恐惧训练24h后, 将小鼠再次置于接受过电击的装置(环境A:足底电 栅栏+白光)中,不给与任何刺激,进行环境重现,使用VisuTrack软件(上海欣软)记录5min内的僵住时间(Freezing时间),计算僵住时间百分率,评价小鼠场景条件恐惧表达的特点。

声音线索恐惧表达检测:场景恐惧检测2h后, 将小鼠置于新环境(环境B:三角形半透明黑色套 盒+白色底板+无白光)中,2min适应期后进行30s声音刺激,声音刺激结束30s后将动物取出,记录各个阶段(包括适应期、声音刺激期和间歇期)的僵住时间,计算僵住时间百分率,用于评价3种品系小鼠线索条件恐惧表达的特点。


03

条件性恐惧的自然消退

以C57小鼠为研究对象,分别于条件性恐惧训练后第2,7,14,21和28天对其场景恐惧和声音线索恐惧进行检测,以评价该品系小鼠条件性恐惧的自然消退特点。其中,场景恐惧检测5min内僵住 时间(环境A,无声音信号,不电击),声音线索恐惧检测 30s声音刺激期内僵住时间(环境B,不电击, 2min适应+30s声音信号+30s间歇),计算僵住时间百分率。


04

声音线索恐惧消退训练和消退保持测试

以 C57小鼠为研究对象,在条件性恐惧训练(方法见第一段)后24h进行声音线索恐惧消退训练, 消退训练结束后24h进行消退保持测试。

消退训练方法:将C57小鼠放入B环境电击箱中,适应 2min后,采用“30s声音刺激+30s间歇期"方法给 与10次声音刺激,计算机软件记录适应期、10轮声 音刺激阶段和10轮间歇期的僵住时间,计算僵住时 间百分率,作为消退训练成绩。

消退保持测试方法:将 C57小鼠放入B 环境电击箱中,适应2min 后,给与30s声音刺激1次,刺激结束30s后将动 物取出,记录不同阶段(适应期+30s声音刺激期+ 30s间歇期)内僵住时间并计算僵住时间百分率, 作为消退保持成绩。

05

文章引用(节选)

中国药理学与毒理学杂志2020年2月第34卷第2期,薛瑞,魏肇余,张森品,陈红霞,李云峰,张有志,《小鼠条件性恐惧模型的建立和品系敏感性研究》










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