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旷场(open field test)分析系统是观察研究实验动物神经精神变化、进入开阔环境后的各种行为,例如动物对新开阔环境的恐惧而主要在周边区域活动,在中央区域活动较少,但动物的探究特性又促使其产生在中央区域活动的动机,也可观察由此而产生的焦虑心理。中枢兴奋药物可以明显增加自主的活动而减少探究行为,一定剂量的抗精神病药物可以减少探究行为而不影响自主活动。
旷场实验(open field test)又称敞箱实验,是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。以实验动物在新奇环境之中某些行为的发生频率和持续时间等,反应实验动物在陌生环境中的自主行为与探究行为,以尿便次数反应其紧张度。
使用VisuTrack动物行为学分析软件,需要先设置好动物的识别区域,通过软件自身强大的AI智能识别算法,可以自动识别动物的头部、重心和尾巴,计算动物在旷场实验箱中的活动路程、站立次数、跨格等级、区域偏好等行为。
旷场实验操作简单,在用于抑郁行为学评价中,无适期阶段,操作步骤如下 :
(1) 实验前,动物应适应检测环境 30 ~ 60 min;
(2)实验人员在VisuTrack软件中预先设置好相应的参数,记录好动物的编号、日期、状态信息;
(3) 动物放入测试箱后,即开始检测,检测时间宜为5~10 min;
(4) 每次实验时应从同一位置同一方向将动物放入测试箱中央。
(1) 总路程(total distance):动物在实验记录时间内产生的物理位移累积;
(2) 速度(speed):动物在单位时间产生的物理位移。 5min内正常动物总路程多为1000~2500cm,速度为3~8cm/ s。 动物出现抑郁行为时,速度减少;
(3) 运动总时间(total move time):动物在实验记录时间内的产生物理位 移时所需的时间累积。 正常动物运动时间多大于检测时间的30%;抑郁行为判断标准:与对照组相比有显著性减低(P<0. 05);
(4) 站立次数(number of standing):动物在实验记录时间内的站立总次数。10min检测时间,正常大鼠站立次数 20 ~ 50 次。10min检测时间,空白对照组小鼠站立次数 60~130次;抑郁行为判断标准:与对照组相比显著减低 (P < 0. 05)。
(5)粪便数量反应大鼠的焦虑情况。(VisuTrack软件是目前市面上一款能够自动检测旷场实验箱中粪便数量的动物行为学分析软件)
1、实验前需要对实验动物每天抚摸1-2min以减少非特异性应激刺激对实验动物检测中的影响。
2、实验过程中需要弱光照明,观察者尽量与测试动物分隔。
3、实验过程中需要环境安静。
4、进行旷场检测时,需要对实验动物进行筛选,有些实验动物在正常情况下水平方向或垂直方向的活动情况显著低于同批动物平均水平,则需要将这些动物预先剔除。
5、实验前需要提前至少3小时将动物带入实验室,降低动物对新环境的不安情绪。
6、实验动物的性别、周龄尽量保持一致,因为激素水平可能会影响动物行为。
7、注意实验动物的昼夜节律,在24h内有其活动周期,尽量选择同一时间段开展实验。
8、OFT实验对动物各方面影响较小,而其他行为学实验(如强迫游泳、水迷宫、悬尾实验)影响较大,因此同一批动物进行不同行为学测试时,应先进行OFT实验。
9、实验应在隔音,光强度和温、湿度适宜且保持一致的行为实验室内进行。
10、两次实验之间清洗实验设备,以免上次动物余留信息影响下次实验结果。