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你知道正确的悬尾实验该怎么做吗?
点击次数:264 发布时间:2020-06-23
  悬尾实验(Tailsuspensiontest,TST)是一种经典而又能快速评价抗抑郁药物、兴奋药物、镇静药物药效的方法。其原理是利用小鼠悬尾后企图逃脱但又无法逃脱,从而放弃挣扎,进入特有的抑郁不动状态,实验过程中记录动物不动时间来反映抑郁状态,抗抑郁药物、兴奋药物能明显地缩短改变其状态。
  将实验动物的尾部进行固定,使其头部向下悬挂,动物在该环境中挣扎,企图摆脱该困境,在经过努力仍无法摆脱后,出现间断性不动,显示“行为绝望”状态。动物在该环境中拼命挣扎试图逃跑又无法逃脱,从而提供了一个无可回避的压迫环境,一段时间的实验后,记录处于该环境的动物产生绝望的不动状态过程中的一系列参数,动物的表现出的这种典型的“不动状态”,反映了一种被称之为“行为绝望状态”,这种行为绝望模型类似,而且对绝大多数抗抑郁药物敏感,而且其药效与临床药效显著相关,所以被广泛用于抗抑郁药物的初选。
  正确的悬尾实验该怎么做?搜索一下网页,看到实验者更关注一些细节问题,如:怎么悬挂?用什么悬挂?空间多少合适?距离底面多少?小鼠攀爬尾巴怎么解决等问题!如何避免老鼠疼痛引起不适?我们今天在这里讨论一下!供大家参考:
  1.TST悬尾实验不建议用较重的大鼠,因为大鼠只能通过它们的尾巴来支持它们的体重,这对大鼠来说是痛苦的。同样的道理,应该注意避免使用异常重的小鼠(例如用于模拟肥胖的小鼠),在这种情况下,实验者应该寻找替代性的测试,例如强迫游泳实验。
  2.动物从居住环境带入实验环境应适应一段时间,通常至少一个小时。
  3.实验环境应保持安静,突然大的噪音会使小鼠惊慌失措。
  4.使用软件分析时,选择zui佳对比度的背景:白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景;也可选择使用由上海欣软信息科技有限公司生产的带背光板的专业悬尾实验设备;对老鼠的颜色没有要求,更可拍摄出高质量,高对比度的实验录像。
  5.每只小鼠的实验空间多大?参考空间在55高*15宽*11.5cm左右,多通量实验时,为防止动物彼此观察或互相影响,中间用隔板隔开;动物悬挂在隔间中间,宽度和深度足够大,不能与墙壁接触。
  6.悬挂后动物鼻尖与设备地板之前的距离多少?参考距离在20~25cm左右。
  7.底部建议放置一个可拆卸的拖盘,收集粪便或尿液。
  8.悬挂用的胶带应牢固地粘贴在小鼠尾部和悬挂杆上,并且足够坚固以承受正在测试的小鼠的重量。但是,胶带不应该过于粘滞,因为在实验结束会从尾部移除。胶带尺寸应统一,长度17厘米,从一端2厘米做标记。这个2厘米的部分用于将胶带连接到尾部,而剩余的15厘米用于悬挂小鼠;胶带应贴在尾部的尾端,尾部留2-3毫米的距离。
  9.尾巴攀爬阻止器,小鼠在实验过程,会出现追求和攀爬它们自己的尾巴的现象,这是个普遍的问题。解决方法很简单,而且非常有效:将一段塑料管切成4cm长中空圆柱体(内径1.3cm左右,1.5g)放置在小鼠尾巴周围就能防止这种尾巴爬行行为。注意的是,在没有使用阻止器之前,已经成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此应将这类小鼠排除。
  10.分析时仅有前肢但没有后肢介入的小动作可判断为不动;因惯性产生的摆动可判断为不动;上海欣软信息科技有限公司推出的Super系列行为学TailSuspension分析软件(SuperTst悬尾软件)可识别动物的多体位轮廓特征,准确区分并识别出动和不动行为。
  11.实验结束后(通常是6分钟),将动物放回鼠笼,应轻轻将胶带从尾巴上拉下来,不要从尾巴上撕扯胶带,避免给动物带来痛苦;
  12.清洁用品,每次实验完成,收集粪便和尿液,彻底擦拭悬挂盒。
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