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习得性无助抑郁动物模型的建立与条件性回避反应实验方法
点击次数:404 发布时间:2020-05-25

该模型的理论依据来源于Beck的抑郁症认知理论,并由Seligman和Overmier首次提出。当机体遭受到不可逃避的厌恶性刺激(如足电休克)时,会产生一种绝望行为,表现为对刺激的不再逃避,即使在可逃避的环境下也呈现出操作行为缺欠,如逃避行为障碍及自发活动减少等,同时可伴有其他行为改变,如食欲下降、体重减轻、运动性活动减少以及攻击性降低等,此时动物的脑内儿茶酚胺水平降低,被公认为是一种抑郁状态,抗抑郁药可以对抗这种状态。

获得性无助的动物产生的行为欠缺可以在亚慢性(3-7天)的抗抑郁药物治疗下产生翻转,三环类抗抑郁剂、单胺氧化酶抑制剂、非典型抗抑郁剂均可观察到相应的药效。获得性无助由两个部分组成,第yi部分为获得性无助抑郁动物模型的建立,第二部分为条件性回避反应学习期。

实验设备

由透明的有机玻璃制成一个有盖的20´10´10 cm3 笼子,笼底由不锈钢栅(1.5 cm 间隔)制成,侧壁及顶盖上均有通气孔。笼底的不锈钢栅可通电流,电流由发放命令的控制盒控制,一般发放的电流强度为0.8 mA,持续1-15 s,每1min ± 15 s给一次点击(电击持续时间和间隔时间均为随机性的)。――――大鼠适用

实验方法

1. 获得性无助抑郁动物模型的建立

通过有盖的20´10´10 cm3 笼子内的不锈钢栅传送60次随机的无法逃避的足部电击(0.8 mA,持续1-15秒,每1min ± 15秒给一次电击)。

模型大鼠连续两天进行不可逃避的足底电击。对照大鼠放于相同笼中1小时,但不给予电击。

2. 条件性回避反应学习

在不可逃避的电击48 h之后(电击后的第3 天)开始进行回避训练,以便于评价逃避和回避行为。实验时,使用 60´21´30 cm3的穿梭箱,其底面由不锈钢栅构成(1.0 cm 间隔),穿梭箱被一块带有7´7cm2小门的不锈钢板隔成两个相同的箱子。

将动物单个地放入穿梭箱的一端,使其适应测试环境5 min。每次训练的最初3 s出现一个光或声音信号,允许动物在此期间到达另一端的箱中以回避电击。若此间无回避反应发生,则光/声音信号停止后出现一个0.8 mA的足部电击(持续30s)。若此间无逃避反应发生,则电击信号停止,同时将此记作一次逃避失败。共刺激30次,刺激间隔60s,逃避时间>33s为失败,逃避时间<33s为成功。抑郁大鼠失败>10次,未learned heleplessness大鼠逃避失败<5次。在检测后当天给药,此后第4、5、6和7天每天给药一次,第7天给药后第二次进行穿梭检测,以评价相关抗抑郁药的药效。

 

 

采集数据

1.穿梭失败次数(穿梭总次数30次)

穿梭失败次数>10次――――抑郁大鼠

2.穿梭逃避延迟时间――――抑郁大鼠的延迟时间显著高于正常对照组大鼠。

注意事项

1. 实验前一周大鼠开始单笼饲养,实验后动物也需继续单笼饲养。

2. 实验前大鼠体重在200g左右,在穿梭检测时体重不超过300g。大鼠的体重过高或过低均会影响电击的效果及模型的制备。

3. 动物品系不同对于获得性无助反应的建立有影响。不同品系的大鼠对逃避行为的缺欠有着明显的影响。本实验室用雄性SD大鼠的制备出获得性无助行为的比率约为50%,但是用雄性Wistar大鼠低于50%。

4. 获得性无助动物模型的复制多用雄性大鼠,很少用雌性大鼠。由于雌性大鼠会受到性周期的影响,所以会使实验数据产生波动。

5. 检测获得性无助动物逃避行为的缺欠多使用穿梭箱法,也可使用跳台箱法。使用穿梭箱法适应,当适当增加训练的难度以减少随即逃避行为的概率。

6. 获得性无助动物模型的复制过程中应注意不锈钢栅的金属部分短路,或者是大鼠粪便造成的短路。每晚一只大鼠要注意用清洁的水清洗不锈钢栅,尽量烤干水分,避免影响电流强度。

7. 在进行不可逃避足底电击时,大鼠会通过站立、背靠金属栅等多种姿势减少足底电击刺激,从而影响电击的效果。

8. 不可逃避足底电击制备的获得性无助动物模型保持逃避行为的缺欠状态7-10天。

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