穿梭箱实验在小鼠主动回避学习中的作用

目前，对于该脑区在主动回避学习中的调节 机制尚未*明确。目的：探索中脑导水管周围灰质氨基丁酸 (y-Aminobutyric acid，GABA)能神经元在主动回避学习中的调控作用。 方法：通过穿梭箱实验，对实验小鼠进行主动回避训练；通过早期即刻基 因c-fos免yi荧光染色确定小鼠PAG内c-fos表达的变化；利用脑立体定位 注射，将携带有hM3Dq或hM4Di基因的重组腺相关病毒定位注射于 Vgat-cre转基因小鼠的PAG内，待2-3周后GABA能神经元稳定表达hM3Dq 或hM4Di。制备300|im厚度的PAG离体脑片，进行全细胞膜片钳记录， 记录CNO对GABA能神经元活动的调节。应用化学遗传学技术，在清醒 小鼠体内特异性激活或者抑制PAG的GABA能神经元，观察改变GABA 能神经元的活动对小鼠主动回避学习能力的影响；结果：Vgat-ChR2-EYFP 转基因小鼠在主动回避学习中存在延迟建立的特性；主动回避学习中，与 正常小鼠相比，建立迟缓的小鼠PAG内GABA能神经元激活的数量增多；PAG内表达hM3Dq的GABA能神经元被其配体**氯氮平-N-氧化物 (Clozapine-N-oxide，CNO)特异性激活，动作电位发放频率增加，表达 hM4Di的GABA能神经元被CNO特异性抑制，神经元动作电位的发放频 率降低；在主动回避学习过程中，使用CNO特异性激活PAG的GABA能 神经元可以延缓主动回避学习过程，使用CNO特异性抑制PAG的GABA

能神经元并不影响主动回避行为的建立。结论：Vgat-ChR2-EYFP转基因小 鼠存在主动回避学习障碍，PAG的GABA能神经元调节主动回避行为的建 立，激活PAG的GABA能神经元可以起到延缓主动回避行为建立的作用。